多花黄精的组织培养与快速繁殖(规模化生产黄精种苗)

1、植物名称：多花黄精，采自浙江省天台山的野生苗。

2、材料类别：带芽根茎。

多花黄精组培出芽形态

3、培养条件诱导培养基

(1) MS+6-BA 4.0 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.2；增殖培养基(都加NAA 0.2):

(2) MS+6-BA 1.0，(3) MS+6-BA 2.0，

(4) MS+6-BA3.0，

(5) MS+6-BA 4.0，

(6) MS+6-BA 5.0，

(7)M S + 6 - B A 6 . 0；生根培养基：

(8) 1 / 2 M S，

(9)MS+NAA 0.5，

(10) MS+2,4-D 0.5。

各培养基中均添加30 g·L-1 白糖、7 g·L-1 琼脂，pH 5.8。培养条件：温度白天24~26℃，夜间18~20℃; 光强为30 mmol·m-2·s-1，光照时间12 h·d-1。

4、生长与分化情况

4.1 无菌材料的获得及不定芽的诱导

将取回的野生黄精根茎在清水中洗掉泥土，用洗衣粉溶液浸30 min，洗净，剪去须根，切取根茎段芽端1~2cm，置于0.15% 升汞溶液中消毒10 min，然后用无菌水冲洗4 次，切去切口后接种在诱导培养基上。接种15 d 后，芽开始萌发，并长出叶片。30 d 后，诱导不定丛芽。50~6 0 d 后，切割丛芽继续接种在培养基上进行不定芽诱导或继代培养。

4.2 增殖培养

将诱导所得丛芽切成2~3株一丛，分别接种于增殖培养基(2)~(7)上。接种20 d 后，在培养基(5 )上丛芽的增殖率最高，分别为(6 )、(7)、(4)、(3)的1.6、1.9、3.6、5.2 倍，并且丛芽大小适中，稍为黄绿色 ；在培养基(2)上丛芽几乎不增殖，但可以诱导芽的叶片正常发育。

4.3 壮苗及生根培养 先将分化丛芽转接到培养基(2)上培养30 d，再将丛芽分开，取健壮单个根茎芽，接种于培养基(8)~(10)上进行生根培养，以(9)效果最好。培养约20 d，小根茎开始长出白色粗根，30 d 后生根率达100%。再经过20~30 d 培养后，将瓶装苗搬到炼苗棚内，敞口炼苗3d。

4.4 移栽

将经过炼苗的黄精根茎从接种瓶中取出，用清水洗掉培养基，在0.1% 高锰酸钾溶液中消毒1min，用清水冲洗干净后，假植在沙床上，保持空气湿度95% 以上，用75% 遮阳网遮荫。30d后假植成活率达90%以上。以后每隔7d喷施1次MS营养液。10月下旬，将假植的黄精根茎栽种到整好的露地畦内，将根茎段芽眼向上，每隔10~15 cm 平放1个根茎，行距20~25c m ，覆土4~6 c m ，浇足水。在土壤封冻前，畦面上盖一层有机肥或薄膜，以利保暖越冬。翌年4月，黄精出苗生长。

5、意义与进展

多花黄精系百合科黄精属药用植物，其根茎作中药黄精用。由于长期大量采挖，野生资源面临枯竭的境地。目前已可人工栽培，但由于生产上多采用分根繁殖，其繁殖系数低，生根困难，质量不稳定，故黄精种苗问题成了人工大面积种植的瓶颈。用组织培养技术建立快速繁殖体系，有望能进行规模化生产优质黄精种苗。多花黄精的组织培养与快速繁殖尚未见报道。